Dodatki | Znanost

Jedro deluje kot vladar, ki šiva odzive celic na prostorske ovire

A.J. Lomakin, C.J. Katin, r. Gwalior, Z. Alares, M. Molina, GPF Notre Dame. Srivastava, P. J. Chase, J. M. Garcia-Argos, I. Y. Schitniak, a. Bhargava, M.K. Triscoll, E.S. Welf, r. Petrie, N.S. de Silva, J.M. Gonzalez-Granado, n. Manel, A.M. Lennon-Duminil, DJ M ர் ller, m. Olupite

Materiali / metode, podtekst, tabele, statistika in / ali opombe

Prenesite pod
  • Sl. S1 do S11
  • Tabele S1 do S3
  • Naslov za filme od S1 do S7
Kontrolni seznam za razmnoževanje MDAR

Slike, video in drugi mediji

Film S1
Nekrožne hela-kjotske celice zaznajo razliko med 10 in 5 μm celicami – nadzor celic do 5, ne pa do višine 10 m, kar povzroči hitro rekrutiranje miozina II iz citosola v skorjo. Takoj, ko doseže višino 10 m, reprezentativna celica izrazi MYH9-GFP (psevdobarva z uporabo vročega načina LUT z vročimi in hladnimi toni, ki predstavljajo visok in nizek fluorescenčni signal MYH9-GFP). Desno, ista celica po 5 m zapora. Časovni interval med zaporednimi slikami, 5s. Lestvica, 5 m.
Film S2
Krožne hela-kjotske celice so podvržene edinstvenemu morfodinamičnemu preklopu iz nenadzorovane celične obloge in tvorbe filopodijev, da se odzovejo na 10 do 5 m zapora. Levo, reprezentativna celica, ki je med 20 do 10 m zapora razkrivala MYH9-GFP (lutka v magenta) in češnja LifeAct-M (lutka v cyan). Desno, ista celica med 10 do 5 m zapora. Slika diferencialnih motenj in variacij (DIC) nadzorovanega ploskega mikrokondicionerja je prikazana v sivem kanalu. Časovni interval med zaporednimi slikami, 5s. Lestvica, 5 m.
Film S3
Krožne hela-kjotske celice razširijo jedra in odprejo jedrno ovojnico pred začetkom odziva kontraktilne celice, izpostavljene aktivni krvavitvi iz plazemske membrane med 10 do 5 10m zapora. Reprezentativna celica LAP2-GFP je izpostavljena atomski ovojnici (zelena) in kontaminirana s SiR-aktinom, da razkrije f-aktin (psevdo-barva v škrlatni barvi). Celica je bila omejena na 20 do 10 do 5 m. Video je večkrat umetno prekinjen med 10 do 5 μm premika jedrske ekspanzije-ekspanzije, preden celica najprej umakne prve krožne spojine. Te strukture predstavljajo pasivne izbokline, podobne krvavitvi, ki se pojavijo s stiskanjem telesa celice (tj. Ko endotelno tekočino potisnejo proti plazemski membrani zaradi razpok, ki že obstajajo v celični oblogi). Naša dodatna opazovanja (podatki niso prikazani) razkrivajo, da se take “pasivne” razpoke skoraj takoj kopičijo submperonski kortikalni F-aktin. Neprekinjeno aktivno krvavitev sprožijo aktivni motorji miozina II, ki obložijo “neaktivne” obloge. “Aktivni” razcepi so številni, pogosto velike dolžine in znatno manjši po širini v primerjavi s svojimi “pasivnimi” kolegi. Časovni interval med zaporednimi slikami, 5s. Lestvica, 5 m.
Film S4
Neokrožene jedrske helio-kjotske celice (citoplasti) ne zaznajo razlike med višinami zapor, povezane s skrajšanim odzivom v jedrskih celicah. Na levi je reprezentativna jedrska celica, ki ima MYH9-GFP (psevdo-barva v škrlatni barvi) in LifeActmary (psevdo-barva v modri barvi), ušla postopku obdelave in centrifugalnemu protokolu, ki je bil potreben za nastanek jedrske citoplaste. Desno, reprezentativni jedrski citoplast. Video se začne z prikazom nedefiniranega stanja teh celic, čemur sledi zapor od 20 do 10 do 5 m. Upoštevajte, da kljub svoji majhnosti (višini) jedrska celica, ki uide iz protokola generiranja citoplasta, začne dolgotrajno, aktivno kontralateralno reakcijo (miozin II in intenzivno krvavitev iz plazemske membrane), preden se nadzorovana konzolna postaja ustavi pri 5 போது m pri 27. Premik od 10 do 5 m. Vendar jedrski citoplast kaže le pasiven odziv v obliki nestabilnih izboklin, podobnih plakom, ki nastanejo s fizičnim stiskanjem citoplasta med 10 do 5 m zapora. Časovni interval med zaporednimi slikami, 5s. Lestvica, 5 m.
Film S5
Stiskanje celične obloge do zaporne višine 0,5 m daje samo lokalne in zelo nestabilne izrastke, podobne oblogam, brez kakršnega koli globalnega vpliva na stopnje kontrakcije oktomiozina. Na levi razmnožujejo celico Hella-Kyoto reprezentativni MYH9-GFP (psevdo-barva v škrlatni barvi), češnja Lifeact-M (psevdo-barva v cyan-u) in dodatno DAPI (psevdo-barva v rumeni barvi). Slika diferencialno-interferenčne variacije (DIC) nadzorovanega ploščatega mikrokondicionerja je prikazana v sivem kanalu. Prilagojen je bil natančni položaj kondileverja, to je lamelarne, ne pa tudi elementarne škatle, ki sodeluje pri lokalnem krčenju celic. Brezčasen videoposnetek celice, ki se odziva na pravo, močno lokalno krčenje skorje (500 nm zapora). Časovni interval med zaporednimi slikami, 5s. Merilo, 10 m.
Film S6
Indukcija globalnega odziva endogenih kontraktilnih celic na lokalno jedro, ne pa obloge / zapora citoplazme. V videoposnetku so prikazane reprezentativne hela-kjotske celice z MYH9-GFP (psevdo-barva v škrlatni barvi), LifeAct-M-češnja (psevdo-barva v cyan-u) in DAPI (psevdo-barva v rumeni barvi, da razkrije jedrsko škatlo). Slika diferencialno-interferenčne variacije (DIC) nadzorovanega ploščatega mikrokondicionerja je prikazana v sivem kanalu. Prilagojen je bil natančni položaj kondila, tj. V lokalni celici sta bila zaklenjena samo jedrska škatla spodnje celice in lamelarni del zgornje celice. Višina zapiranja, 2 m. Upoštevajte, da medtem ko lokalna obloga / zapor v citoplazmi povzroča izbokline (pasivni odziv na krčenje telesa), kot je lokalna, kratkotrajna krvavitev, lokalna jedrska zapora vodi do nenehnega povečevanja globalnega krčenja celic. V to stanje preklopi z zamikom (prenos aktivacijskega signala). Časovni interval med zaporednimi slikami, 5s. Merilo, 10 m.
Film S7
Populacija nezrelih dendritičnih celic (ITC), izpostavljenih LifeAct-GFP, je zaprta v mikroizdelanih napravah. ITC, pridobljeni iz primarnega kostnega mozga miši Lifeact-GFP, smo zdravili z nadzorovano CRNA ali CRNA, usmerjeno na CPLA2. Celice so bile posamično omejene na 4 in 3 m višine in posnete s fluorescenčno videomikroskopijo. Časovni interval med zaporednimi filmi, 2 min. Merilo, 25 m.

READ  Toliko bi plačali za fotografije Meghan in Harryja na plaži

Marko Andrej

“Zombi fanatik. Nagrajeni ljubitelj potovanj. Navdušen glasbeni kreten. Spletni strokovnjak za internet. "

Related Posts

Dodaj odgovor

Vaš e-naslov ne bo objavljen. * označuje zahtevana polja

Read also x